Sequestration of Plasmodium falciparum–infected erythrocytes to chondroitin sulfate A, a receptor for maternal malaria: monoclonal antibodies against the native parasite ligand reveal pan-reactive epitopes in placental isolates
Résumé
Les parasites de Plasmodium falciparum expriment des molécules d'adhésion variant à la surface des érythrocytes infectés (IE), qui agissent comme des cibles de protection naturelle. Récemment, il a été démontré que la séquestration d'IE dans le placenta est médiée par la liaison au sulfate de chondroïtine A via le domaine de type duffy binding (DBL) -gamma 3 de la protéine membranaire 1 des érythrocytes de P. falciparum (PfEMP1 (CSA)). Les procédures d'immunisation conventionnelles aboutissent rarement à la production réussie d'anticorps monoclonaux (mAbs) contre de tels candidats vaccins conformationnels. Ici, nous montrons que cette difficulté peut être surmontée en rendant les cellules B de souris Balb / c tolérantes à la surface des érythrocytes humains ou des cellules ovariennes de hamster chinois (CHO) avant d'injecter P falciparum IEs ou des cellules CHO transfectées exprimant la liaison du sulfate de chondroïtine A (CSA) domaine (DBL-gamma 3) du gène FCR3 var (CSA). Nous avons fusionné des cellules de rate avec des cellules P3U1 et obtenu entre 20% et 60% mAbs qui marquent spécifiquement la surface des érythrocytes infectés matures du phénotype CSA (mIE (CSA)) mais pas d'autres phénotypes adhésifs. Étonnamment, 70,8% des 43 mAbs analysés dans ce travail étaient des IgM. Tous les mAbs immunoprécipités PfEMP1 (CSA) à partir d'extraits de (125) I IE marqué en surface (CSA). Plusieurs AcM se sont liés efficacement à la surface des parasites se liant à la CSA de différentes zones géographiques et aux isolats placentaires d'Afrique de l'Ouest. Les mAb à réactivité croisée sont dirigés contre le DBL-gamma 3 (CSA), démontrant que ce domaine, qui assure la liaison de la CSA, est capable d'induire une réponse immunitaire panréactive. Ce travail est une étape importante vers le développement d'un vaccin à base de DBL-gamma 3 qui pourrait protéger les femmes enceintes de la pathogenèse. ).