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HAL : hal-00519834, version 1

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Science 329, 5994 (2010) 967-71
Cell lineage reconstruction of early zebrafish embryos using label-free nonlinear microscopy.
Nicolas Olivier 1, Miguel A Luengo-Oroz 2, Louise Duloquin 3, 4, Emmanuel Faure 5, Thierry Savy 5, Israël Veilleux 1, Xavier Solinas 1, Delphine Débarre 1, Paul Bourgine 5, 6, Andrés Santos 2, Nadine Peyriéras 3, 4, 7, Emmanuel Beaurepaire 1
(20/08/2010)

Quantifying cell behaviors in animal early embryogenesis remains a challenging issue requiring in toto imaging and automated image analysis. We designed a framework for imaging and reconstructing unstained whole zebrafish embryos for their first 10 cell division cycles and report measurements along the cell lineage with micrometer spatial resolution and minute temporal accuracy. Point-scanning multiphoton excitation optimized to preferentially probe the innermost regions of the embryo provided intrinsic signals highlighting all mitotic spindles and cell boundaries. Automated image analysis revealed the phenomenology of cell proliferation. Blastomeres continuously drift out of synchrony. After the 32-cell stage, the cell cycle lengthens according to cell radial position, leading to apparent division waves. Progressive amplification of this process is the rule, contrasting with classical descriptions of abrupt changes in the system dynamics.
1 :  Laboratoire d'optique et biosciences (LOB)
CNRS : UMR7645 – INSERM : U696 – Polytechnique - X
2 :  Biomedical Image Technologies, Biomedical Research Center (CIBER-BBN)
Universidad Politécnica de Madrid
3 :  Neurobiologie & Développement (N&D)
CNRS : UPR3294
4 :  Institut de Neurobiologie Alfred Fessard (INAF)
CNRS : FRC2118
5 :  Centre de recherche en épistémologie appliquée (CREA)
CNRS : UMR7656 – Polytechnique - X
6 :  Réseau National des Systèmes Complexes (RNSC)
CNRS : UMR0 – INSERM : U0 – Institut national de la recherche agronomique (INRA) : UMR0 – Institut Français de Recherche pour l'Exploitation de la Mer (IFREMER) – Centre de coopération internationale en recherche agronomique pour le développement [CIRAD] : UMR0 – INRIA – Institut de recherche pour le développement [IRD] – CGE – CPU
7 :  Institut des Systèmes Complexes - Paris Ile-de-France (ISC-PIF)
CNRS : UMR7656 – Institut Curie – Université Paris XI - Paris Sud – Université Paris I - Panthéon-Sorbonne – Université Pierre et Marie Curie (UPMC) - Paris VI – École normale supérieure de Cachan - ENS Cachan – Ecole normale supérieure de Paris - ENS Paris – Polytechnique - X
Sciences du Vivant/Neurosciences

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