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HAL : hal-00442911, version 1

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Lab on a Chip 9, 10 (2009) 1412-21
Microfluidic chips for the crystallization of biomacromolecules by counter-diffusion and on-chip crystal X-ray analysis.
Kaouthar Dhouib 1, Chantal Khan Malek ( ) 2, Wilhelm Pfleging 3, Bernard Gauthier-Manuel 2, Roland Duffait 4, Gaël Thuillier 2, Rosaria Ferrigno 5, Lilian Jacquamet 6, Jeremy Ohana 6, Jean-Luc Ferrer 6, Anne Théobald-Dietrich 1, Richard Giegé 1, Bernard Lorber 1, Claude Sauter ( ) 1
(21/05/2009)

Microfluidic devices were designed to perform on micromoles of biological macromolecules and viruses the search and the optimization of crystallization conditions by counter-diffusion, as well as the on-chip analysis of crystals by X-ray diffraction. Chips composed of microchannels were fabricated in poly-dimethylsiloxane (PDMS), poly-methyl-methacrylate (PMMA) and cyclo-olefin-copolymer (COC) by three distinct methods, namely replica casting, laser ablation and hot embossing. The geometry of the channels was chosen to ensure that crystallization occurs in a convection-free environment. The transparency of the materials is compatible with crystal growth monitoring by optical microscopy. The quality of the protein 3D structures derived from on-chip crystal analysis by X-ray diffraction using a synchrotron radiation was used to identify the most appropriate polymers. Altogether the results demonstrate that for a novel biomolecule, all steps from the initial search of crystallization conditions to X-ray diffraction data collection for 3D structure determination can be performed in a single chip.
1 :  Architecture et réactivité de l'ARN (ARN)
CNRS : UPR9002 – Université Louis Pasteur - Strasbourg I
2 :  Franche-Comté Électronique Mécanique, Thermique et Optique - Sciences et Technologies (FEMTO-ST)
CNRS : UMR6174 – Université de Franche-Comté – Université de Technologie de Belfort-Montbeliard – Ecole Nationale Supérieure de Mécanique et des Microtechniques
3 :  Forschungszentrum Karlsruhe (FZK)
Helmoltz
4 :  Centre de Transfert des Micro et Nanotechnologies (CTMN)
CTMN
5 :  Institut des nanotechnologies de Lyon - Site d'Ecully (INL)
CNRS : UMR5270 – Université Claude Bernard - Lyon I – Institut National des Sciences Appliquées (INSA) - Lyon – Ecole Centrale de Lyon
6 :  Institut de biologie structurale (IBS)
CNRS : UMR5075 – CEA : DSV/IBS – Université Joseph Fourier - Grenoble I
Sciences du Vivant/Biochimie, Biologie Moléculaire/Biologie moléculaire

Sciences du Vivant/Biologie cellulaire

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